Zakaj je treba spektrofotometer nastaviti na določeno valovno dolžino?

2024 Avtor: Miles Stephen | [email protected]. Nazadnje spremenjeno: 2023-12-15 23:40

Ko prilagodite valovna dolžina na a spektrofotometer , ti so spreminjanje položaja prizme ali uklonske rešetke tako, da je drugačen valovne dolžine svetlobe so usmerjena proti reži. Manjša kot je širina reže, boljša je sposobnost instrumenta za ločevanje različnih spojin.

Pri tem, na katero valovno dolžino bo nastavljen spektrofotometer?

Glede na obseg valovne dolžine svetlobnega vira ga lahko razvrstimo v dve različni vrsti: UV-vidni spektrofotometer: uporablja svetlobo v ultravijoličnem območju (185 - 400 nm) in vidnem območju (400 - 700 nm ) spektra elektromagnetnega sevanja.

Podobno, zakaj morate kalibrirati spektrometer vsakič, ko spremenite valovno dolžino? Spektrofotometer mora biti kalibrirano proti slepi raztopini tako to meritve po tem lahko uporabijo absorbanco slepe raztopine kot ničelno referenco. Merilo sposobnosti snovi, da absorbira določeno svetlobo valovna dolžina.

pri kateri valovni dolžini je treba odčitke vzeti?

Vzemi odčitkov v intervalih 5 nm malo pred in po tem valovna dolžina . Na primer, če je bila največja absorbanca ugotovljena pri 450 nm, da bi dobili natančnejši rezultat branje λmax, vzemite absorbanco odčitkov pri 440, 445, 455 in 460 nm.

Zakaj merite absorbanco raztopine pri 550 nm?

Beljakovine reagirajo z bakrovimi ioni v bazi rešitev da tvori vijolično obarvan kompleks, ki absorbira svetlobo na 550 nm . Zato z meriti koncentracijo kompleksa z uporabo A550 ( Absorbanca pri 550 nm ), ti so tudi meriti koncentracijo beljakovin.