Kazalo:

Kako obremenjujete gelsko elektroforezo?
Kako obremenjujete gelsko elektroforezo?

Video: Kako obremenjujete gelsko elektroforezo?

Video: Kako obremenjujete gelsko elektroforezo?
Video: Электрофорез в агарозном геле 2024, November
Anonim

Nalaganje vzorcev in zagon agaroznega gela:

  1. Dodaj nalaganje pufer za vsak vaš vzorec DNK.
  2. Ko se strdi, postavite agarozo gel v gel škatla ( elektroforeza enota).
  3. Napolnite gel škatla z 1xTAE (ali TBE), dokler ne gel je pokrito.
  4. Previdno obremenitev lestev z molekulsko maso v prvi pas gel .

V zvezi s tem, koliko DNK morate naložiti za gelsko elektroforezo?

Znesek DNK za nalaganje na vrtino je spremenljiva. Najmanjša količina DNK ki ga lahko zaznamo z etidum bromidom, je 10 ng. DNK količine do 100 ng na vdolbino bodo povzročile oster, čist pas na obarvanem z etidijevim bromidom gel.

Poleg tega, zakaj se pri gelski elektroforezi namesto vode uporablja pufer? The pufer je potreben za vzdrževanje pH raztopine DNK blizu nevtralne ravni, ker lahko postane kisla z elektrolizo. Električni tokovi, ki jih povzročajo elektrode, lahko povzročijo vodo molekule za disociacijo in sproščanje ionov H+.

Ljudje se tudi sprašujejo, zakaj se marker uporablja pri gelski elektroforezi?

Manjši delci se premikajo hitreje in zato dlje kot večji delci, ko se prebijajo skozi gel . Zakaj se uporablja marker pri teku drobcev skozi gel ? A marker vsebuje fragmente DNK znane velikosti. Označevalci se izvajajo v vsakem gel za primerjavo z neznanimi fragmenti v dr gel pasovih.

Koliko DNK je mogoče videti na agaroznem gelu?

Večina agarozni geli so narejene med 0,7 % in 2 %. 0,7 % gel bo kažejo dobro ločitev (ločljivost) velikih DNK fragmenti (5–10 kb) in 2 % gel bo kažejo dobro ločljivost za majhne fragmente (0,2–1 kb).

Priporočena: