Kazalo:

Kako ugotovite koncentracijo DNK iz absorbance?
Kako ugotovite koncentracijo DNK iz absorbance?

Video: Kako ugotovite koncentracijo DNK iz absorbance?

Video: Kako ugotovite koncentracijo DNK iz absorbance?
Video: 10 лучших продуктов с высоким содержанием белка, которые следует есть 2024, November
Anonim

Koncentracija DNK se oceni z merjenjem absorbance pri 260 nm, prilagajanje A260 meritev motnosti (merjeno z absorbance pri 320 nm), pomnožimo s faktorjem redčenja in uporabimo razmerje, da je A260 1,0 = 50 µg/ml čiste dsDNA.

Prav tako ljudje sprašujejo, kako najdete koncentracijo DNK?

Za določitev koncentracije DNK v izvirnem vzorcu opravite naslednji izračun:

  1. Koncentracija dsDNA = 50 μg/mL × OD260 × faktor redčenja.
  2. Koncentracija dsDNA = 50 μg/mL × 0,65 × 50.
  3. Koncentracija dsDNA = 1,63 mg/mL.

Tudi, kaj je dobra koncentracija DNK? A dobro kakovost DNK vzorec mora imeti A260/A280 razmerje 1,7-2,0 in A260/A230 razmerje večje od 1,5, a ker se občutljivost različnih tehnik na te kontaminante razlikuje, je treba te vrednosti jemati le kot vodilo za čistost vašega vzorca.

Ali na ta način DNK absorbira pri 280 nm?

Razmerje absorbance pri 260 nm vs 280 nm je se običajno uporablja za ocenjevanje DNK kontaminacija beljakovinskih raztopin, saj beljakovine (zlasti aromatične aminokisline) absorbirati svetloba pri 280 nm.

Kako uporabljate NanoDrop za koncentracijo DNK?

V bistvu nanokapljica vam daje možnost izbire DNK , RNA, beljakovine. Izbrati morate DNK , nato nalijte 2 ΜL vode (mili Q prednostno) izberite "Prazno", nato pa nalijte še 2 ΜL vode, da potrdite, da je mera 0. Nato položite 2 ΜL svojega vzorca. Dobili boste meritev.

Priporočena: