Ali obstajajo druge metode za čiščenje produktov PCR?
Ali obstajajo druge metode za čiščenje produktov PCR?

Video: Ali obstajajo druge metode za čiščenje produktov PCR?

Video: Ali obstajajo druge metode za čiščenje produktov PCR?
Video: ВОДА приближается! Рыбалка в диком месте. Забыл спички!! 2024, November
Anonim

Za aplikacije, ki zahtevajo PCR čiščenje ali potrditev PCR rezultati, tam sta dva metode na splošno sledi: PCR izdelek izolacijo s kolono in gelom čiščenje iz agaroznega gela.

Kakšna vrsta kromatografije se tukaj uporablja za čiščenje produktov PCR?

Za čiščenje produktov PCR se uporablja izključitvena kromatografija po velikosti. To ujame majhne molekule, kot so beljakovine, temeljni premazi , in nukleotidi, medtem ko so velike molekule, kot so produkti PCR, prevelike, da bi vstopile v kroglice in prešle skozi kolono v zbiralne epruvete.

Pa tudi, kako očistiš DNK? V bistvu lahko očistiti tvoj DNK vzorcev z liziranjem vzorcev vaše celice in/ali tkiva z uporabo najustreznejšega postopka (mehanska motnja, kemična obdelava ali encimska prebava), izolacijo nukleinskih kislin iz kontaminantov in obarjanjem v ustrezni pufrski raztopini.

Poleg tega, zakaj čistimo izdelek PCR?

Čiščenje DNK iz a PCR reakcija je običajno potrebna za nadaljnjo uporabo in olajša odstranitev encimov, nukleotidov, začetnih in pufrskih komponent. Običajno uporabljene metode uporabljajo vrtljive kolone, ki vsebujejo matriks silicijevega dioksida, na katerega se lahko selektivno veže DNK v prisotnosti kaotropnih soli.

Zakaj je treba DNK očistiti?

mi čist gor DNK iz vodnih raztopin za odstranjevanje puferskih soli, encimov ali drugih snovi, ki bi lahko vplivale na nadaljnje aplikacije. Primeri vključujejo PCR reakcijo čist gor, čist gor po omejevalnih digestih in čist genoma ali plazmida DNK kontaminirana s celičnimi beljakovinami/ostanki.

Priporočena: